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标记物与胶体金结合的三个力            【字体:
标记物与胶体金结合的三个力
作者:佚名    文章来源:北京万泰生物药业有限公司    点击数:    更新时间:2006-6-22
众所周知,标记物是通过三个作用力与胶体金相结合的,一是静电引力,二是疏水相互作用,三是配位键。对蛋白而言,调节标记pH的主要目的是使其包含在内部的疏水性氨基酸残基暴露,而不是刻意使蛋白带正点荷。在p H=pI+0.5的条件下,蛋白整体上是呈负电性的,只是其碱性氨基酸残基为正电性。我们认为,在最适的标记条件下,如果标记物的硫原子很少,对大分子而言,结合力是以疏水作用为主的;对小分子而言,结合力是可能是静电引力为主,也可能以疏水作用为主的;如果标记物的硫原子很多,那肯定的配位键是主角,因为配位键的作用力最强 了。配位键既有其有利的一面,又有其不利的一面。有利面是您可以利用它来牢牢固定一些难标记的物质,如某些分子量小,疏水性氨基酸残基少的蛋白,这几乎相当与共价结合了。如通过巯基化,还可以将一些小分子的抗原与胶体金标记。另外,通过加入巯基化的封闭剂,可以大大增加胶体金结合物的稳定性。有的采用此方法封闭,胶体金结合物在两年内活性几乎没有下降。不利面是万一标记物中的硫原子过多,它又很容易在胶体金之间起到桥联的作用,而使胶体金相互凝集。在一些情况下,即使将标记的p H调节到12以上,胶体金仍然会凝集的。

作者:RAPIDTEST

文章录入:竹林仙翁    责任编辑:竹林仙翁 
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